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Sequencher - DNA序列分析软件

DNA序列分析软件,用于序列组装比对突变位点发现
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Sequencher DNA 序列分析软件 提供 Sanger 测序数据的剪切、拼接、编辑、差异比较和报告工具,并通过配套 NGS 算法与 RNA-Seq 工具,支持参考序列比对、从头组装、变异检测及差异表达分析。

Sequencher 将序列、测序峰图、参考序列与分析结果组织在图形化工作环境中。用户可围绕序列质量、拼接关系和候选变异查看原始数据,并结合差异表、注释和汇总报告整理结果。

对于同时使用 Sanger 和 NGS 的研究流程,可将项目中的一致序列(consensus sequence)作为 NGS 比对的参考序列。Sequencher Connections 则提供与公共序列数据开展比较和检索的工具。

Sanger 数据处理与序列拼接

Sequencher Sanger 峰图、序列及差异表联合查看示例

在序列与测序峰图之间检查数据

可对测序读段进行编辑与剪切,使用拼接和比对工具构建重叠群(Contig),并结合峰图查看候选差异或低质量区域。支持正向与反向数据的联合检查。

结果可结合注释、差异表和报告查看,便于将候选位点与对应的序列及峰图联系起来。

读段末端剪切

Trim Ends 用于处理序列末端的低质量或模糊数据;执行前可预览拟剪切区域并调整条件。Batch Revert Trim Ends 可批量恢复两端或指定一端已剪切的部分碱基。

载体与参考范围处理

Trim Vector 用于剪切序列末端的载体等指定序列,Trim to Reference 用于去除超出已拼接参考序列范围的末端。这里的 Vector 指载体序列。

参考序列引导拼接

Assemble to Reference 可将新数据与参考序列组织在一起,并为新数据关联参考序列的碱基编号体系与特征,便于在不同拼接结果之间使用一致坐标。

按名称组织批量拼接

Assemble by Name 可利用序列文件名称中的共享标识符组织样本,将按命名规则区分的多个测序项目纳入批量分析,适合具有结构化命名习惯的实验室。

SNP、杂合位点与序列差异比较

可比较一组 DNA 序列,或将一条及多条序列与参考序列进行比对。Call Secondary Peaks 功能用于识别潜在杂合位点,用户可调整相关判定条件,并在拼接概览中查看候选位置。

Variance Table(差异表)可比较序列或多个重叠群的一致序列。表格中的单元格与原始数据关联,便于直接查看、核对或编辑候选差异,并同步更新对应的序列与峰图。

Sequencher 一致序列、翻译结果、参考序列及测序峰图差异比较示例

可结合一致序列与参考序列的翻译结果检查差异,并使用导出和报告选项整理分析结果。参考序列编号可用于保持不同拼接项目中的 SNP 位置标识一致。

NGS 比对、组装与变异检测

Sequencher 通过图形化接口调用配套 NGS 工具,组织参考引导比对、从头组装、质量检查和变异分析。各工具的用途不同,可按实验数据和分析任务选择。

GSNAP 与 BWA-MEM:参考引导比对
用于将测序数据比对到参考序列;可构建并重复使用 GSNAP 数据库和 BWA 索引,组织后续参考比对任务。
Velvet:从头组装
通过配套 Velvet 工具开展 de novo 组装,用于相应的 NGS 组装任务。
FastQC:原始数据质量报告
查看并保存 NGS 原始数据文件的质量与元数据信息,包括每碱基、每序列质量以及 GC 含量等报告内容。
SAMtools:变异检测与 VCF
对相应比对输出开展变异检测,并生成 VCF 文件记录候选变异。
Tablet:比对与组装结果查看
可查看 NGS 读段及比对中的候选变异,并通过不同显示模式检查结果。

RNA-Seq 转录分析与差异表达

Sequencher 提供 Cufflinks 套件相关的图形化工作流程,用于转录本分析及差异基因表达研究。配套工具包括 Cuffdiff、Cuffquant 和 Cuffnorm,可结合分析条件配置相应任务。

Sequencher RNA-Seq 表达结果表与柱状图示例

条件与重复样本设置

Conditions and Replicates Editor 用于组织 Cuffdiff 和 Cuffnorm 分析中的实验条件与重复样本,便于管理多样本表达分析设置。

表达结果图表与导出

可通过散点图、火山图和柱状图查看结果,结合基因名称或标识符查找数据,使用排序和筛选选择绘图内容,并导出图形。

External Data Browser(外部数据浏览器)可用于管理 DNA-Seq 和 RNA-Seq 分析记录,查看数据与参数注释,组织已有运行结果。

序列检索与外部数据比较

Sequencher Connections 支持在不同数据库和参数设置下开展检索,可组织并行分析任务,并查看与比较相应结果。

BLAST 与本地检索

可连接公共 BLAST 服务进行相似序列检索,也可利用 Local-BLAST 检索本机数据库,结合不同参数比较查询结果。

Primer-BLAST 与多序列比对

可通过 Primer-BLAST 设计并检查引物,并将引物对序列保存到 Sequencher 项目;Connections 还提供 MUSCLE 多序列比对及相关树图比较工具。

适用分析任务

  • Sanger 读段剪切、Contig 拼接、峰图编辑和参考序列比较。
  • SNP、潜在杂合位点及其他序列差异的研究与结果整理。
  • 具有结构化样本命名的多项目批量测序分析。
  • NGS 数据质量检查、参考比对、从头组装及变异文件生成。
  • RNA-Seq 条件与重复样本组织、差异表达结果查看和图表输出。

运行环境与采购咨询

可结合测序数据类型、项目规模和所需配套工具确认软件与运行环境。Mac 环境需特别核对可用安装包及 64 位系统兼容条件,不能默认支持当前所有 macOS 系统。

可提供 Sequencher DNA 序列分析软件正版授权采购、选型与部署咨询。可按 Sanger、NGS 或 RNA-Seq 需求,确认分析流程、配套工具与服务安排。

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