Beacon Designer™ 常见问题解答
Beacon Designer™ 是一款用于引物和探针设计的软件,但在使用过程中可能会遇到 BLAST 分析慢、序列获取方式、引物/探针设计失败原因排查 等问题。以下是关键解决方案的简要总结:
1. BLAST 分析耗时过长怎么办?
BLAST 结果返回时间受 NCBI 服务器负载 和 网络速度 影响,可能从几秒到数分钟不等。
解决方案:
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使用 本地化 Standalone WWW BLAST 工具(无需依赖 NCBI 服务器)。
2. Beacon Designer™ 如何从互联网获取序列?是否需要浏览器?
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程序通过 Entrez 接口 直接下载序列,无需浏览器。
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仅当通过 View > Sequence Details 查看序列详情时,会自动调用浏览器打开网页。
3. 如何确定引物/探针设计失败的原因?
在 Primer/Probe Properties 标签页中,红色状态栏会显示失败参数及数量,例如:
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引物失败示例:
Status: No primer pairs found: 12348 rejected (Prodlen: 6794, Tm Match: 4728, Low Ta Opt: 426)
调整建议: 增加产物长度(Prodlen)或 Tm 容差范围。 -
探针失败示例:
Status: No TaqMan® found: 31 rejected (Hairpin: 16, 5'End starts with G: 15)
调整建议: 在高 级参数中放宽发夹 ΔG 限制或修改 5'端碱基规则。
4. 针对人类或真核基因组数据库的 BLAST 搜索耗时过长怎么办?
问题原因:
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基因组重复序列会导致结果页面持续加载,程序需等待页面全部加载才能获取数据。
解决方案:
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在 BLAST 界面中勾选 “Filter” 选项(过滤生物无关的重复序列)。
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方法路径:
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选择序列 → 点击工具栏 BLAST → 选择 Human genome 和 genome (reference only) 数据库 → 点击 Advanced → 勾选 Filter → OK → Search。
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2023-09-06
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